复方壳多糖真皮凝胶生长代谢初探
研究复方壳多糖真皮凝胶中人皮肤成纤维细胞在不同培养基中的生长代谢特性,为复方壳多糖组织工程真皮替代物的扩大化生产奠定基础.:从小儿包皮(患者家属知情同意并自愿捐献)真皮层中分离人皮肤成纤维细胞.以方瓶作为二维培养系统,以复方壳多糖胶原凝胶作为三维培养系统,将人皮肤成纤维细胞(0.75×104/ml,1.5×104/ml凝胶)分别接种至不同培养系统中,采用12种不同的培养基进行换液培养,每隔48h换液取样,采用MTT法检测细胞增殖情况、氯胺-T法检测胶原合成情况、葡萄糖和乳酸测定试剂盒分析培养基中葡萄糖消耗量和乳酸生成量,以观察细胞的生长代谢特性,与此同时测量胶原凝胶的收缩情况.研究表明，补充脯氨酸(35mg/L)和丝氨酸(47.25mg/L)的DMEM培养基最适合复方壳多糖真皮凝胶的体外生长成熟。二维培养系统中，人皮肤成纤维细胞的比生长速率，葡萄糖代谢能量利用率高，适合大量制备组织工程种子细胞。随着胶原收缩，凝胶孔隙变小，营养物质的传递阻力进一步加大，复方壳多糖真皮在不同培养基中生长代谢情况均低于二维培养，因此，工程化组织在体外培养过程中应着重改善三维支架内的营养物质传递效率以维持细胞的活力和功能，从而加速体外熟化过程，缩短培养周期，保证功能化的真皮替代物以满足临床的移植需要。
组织工程 成纤维细胞 复方壳多糖真皮凝胶 生长代谢
唐辉
第三军医大学第三附属医院皮肤科
国内会议
西安
中文
349-350
2013-04-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）