异源竞争ELISA法筛选有机磷农药宽谱单克隆抗体
本文采用异源模式筛选对硫磷杂交瘤细胞,以获得有机磷农药宽谱单克隆抗体.以PA0204-BSA免疫小鼠,首先用PA0204-OVA和PA0304-OVA作为同源和异源间接ELISA筛选出24个强阳性细胞,并测出对硫磷抑制中浓度IC50;从中选择抑制较好的10个细胞株,PA0203-OVA、PA0204-OVA、PA0304-OVA、PA0314-OVA及PA0318-OVA五种包被原下测定对硫磷及类似物的抑制情况,获得识别谱较广的2G6和7B2两个细胞株.经克隆、建株、腹水制备及纯化后,采用间接竞争ELISA法测定单克隆抗体的灵敏度和特异性.结果表明,2G6单抗在PA0314-OVA做包被原的条件下,与对硫磷、甲基对硫磷、杀螟硫磷的抑制中浓度IC50为14.1、19.6、21.7ng/mL;7B2单抗在PA0304-OVA做包被原的条件下,与对硫磷、甲基对硫磷、杀螟硫磷的亲和力差异较大,抑制中浓度IC50分别为35.3、12.1、8.1ng/mL.获得的这两株宽谱抗体可用于对硫磷、甲基对硫磷及杀螟硫磷的快速定性及半定量检测。
有机磷农药 异源模式 ELISA筛选 宽谱单克隆抗体
兰美静 刘蕊 郭逸蓉 程敬丽 刘毅华 桂文君
浙江大学农药与环境毒理研究所 中国林业科学研究院亚热带林业研究所
国内会议
上海
中文
225-230
2014-10-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）