鸡传染性贫血病毒SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立

摘要：

根据鸡传染性贫血病毒基因组保守区域设计1对扩增片段为180bp的特异性引物,构建PGM—T—CIAV重组质粒,制备阳性标准品,建立SYBR GreenⅠ荧光定量PCR标准曲线,并做敏感性试验、特异性试验和重复性试验.结果显示,CIAV的CT阈值与标准品浓度在5.33×108拷贝/ul与5.33 ×103拷贝/ul间呈良好的线性关系,相关系数为R2=0.998,斜率为-3.443,产物TM值在86℃左右.该方法与REV、ALV、MDV、IBDV基因组均无交叉反应,敏感性为5.33拷贝/ul,比常规PCR反应高1000倍,批内和批间重复试验变异系数均小于3％.结果表明,建立的CIAV SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法,可实现对该病的早期诊断以及感染程度的定量分析的检测.

关键词： 鸡传染性贫血病毒 早期诊断 荧光定量聚合酶链式反应

作者: 杨丽聪 苏霞 朱瑞豪 周宏专 徐福州 孙继国 杨兵

作者单位: 北京市农林科学院畜牧兽医研究所畜禽疫病防控技术北京市重点实验室,北京 100097 河北农业大学,河北 保定 071001

会议类型: 国内会议

会议名称: 第四届京津冀一体化畜牧兽医科技创新研讨会暨“瑞环杯”新思想、新方法、新观点论坛

会议地点: 石家庄

会议语种:中文

页码: 197-200

在线出版日期: 2014-10-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）