人HIF-1α miRNA干扰质粒的构建及其在LoVo细胞中有效性的检测
目的:构建人HIF-1α的miRNA特异性干扰表达载体并转染人结肠癌LoVo细胞检测其有效性. 方法:设计合成针对人HIF-1α基因的特异性miRNA前体寡核苷酸,依次通过退火、连接,构建含HIF-1α前体miRNA的重组干扰质粒pcDNA TM 6.2-GW/EmGFP-HIF-1α-miR,并转染人结肠癌LoVo细胞,经半定量RT-PCR技术鉴定其干扰有效性.结果经双酶切及测序鉴定,针对人HIF-1α基因的两组miRNA干扰质粒构建成功,并能够有效抑制人结肠癌LoVo细胞中HIF-1αmRNA表达. 结论:成功构建针对人HTF-1α基因的miRNA特异性有效干扰质粒,为后续HIF-1α基因慢病毒miRNA表达载体的构建及其在结肠癌多药耐药中的相关功能研究奠定基础.
结肠癌 缺氧诱导因子-1α 微小核糖核酸 干扰质粒 感觉细胞 有效性检测
丁震宇 朴瑛 谢晓冬
110840 沈阳沈阳军区总医院全军肿瘤诊治中心
国内会议
上海
中文
122-127
2014-06-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)