通过增加痰液量和超声裂菌提高结核分支杆菌荧光定量PCR检出率
目的:通过增加痰液量和超声破碎法提取痰液中的结核菌DNA,提高结核分支杆菌荧光定量PCR的检出率. 方法:收集至少5ml的痰液,加入2-3倍体积的4%氢氧化钠液化后,取1ml按照试剂盒操作说明书进行常规法抽提痰液中的结核菌DNA,剩余部分用于改进的超声破碎法提取结核菌DNA;两者同时在罗氏公司的LightCycler 480上进行定量PCR检测.共有206例肺结核患者和103例对照组患者;患者还同时进行结核菌涂片,并在BD公司的MAGIT960仪器上进行液体快速培养结核菌. 结果:采用增量超声法,对于涂片阳性,培养阳性的结核患者,阳性检出率由87.5%(可信区间为81.4%-93.6%)提升至95.5%(可信区间为91.7%-99.4%)(p<0.05).对于涂片阴性,培养阳性的患者,阳性检出率由57.4%(可信区间为47.5%-67.4%),提高至83%(可信区间为75.4%-90.6%)(p<0.01).增量超声法比常规方法,定量值平均提高14倍以上. 结论:通过增加痰液量和超声破碎法提取痰液中的结核菌DNA,显著提高了结核菌的检出率,值得进一步推广应用.
结核分支杆菌 荧光定量多聚链式反应检出率 痰液量 超声裂菌
张军 王晓飞 王瑞东 韩敏 景玲杰 陈晋
同济大学附属上海市肺科医院检验科
国内会议
重庆
中文
231-235
2013-07-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)