人脐带间充质干细胞向脂肪细胞诱导分化的实验研究
目的:探讨人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)的分离、纯化、培养条件及其生物学特性;观察不同诱导条件下hUCMSCs向脂肪细胞定向分化的差别,探索脐带间充质干细胞向脂肪细胞分化的最佳条件,为其在组织工程脂肪中应用的可行性提供理论依据. 方法:无菌条件下收集剖宫产新生儿脐带,冲洗干净血管内残存积血,制备成1mm3大小组织块,接种于含DMEM/F 12培养基的培养瓶中,进行原代培养.当细胞达到80％融合状态时,消化传代进行纯化和扩增培养.观察并记录细胞形态学变化,测定细胞表面标记;利用不同组合的成脂诱导培养基定向诱导hUCMSCs分化为脂肪细胞;利用油红-O免疫组化染色鉴定分化后的细胞;统计学分析不同条件诱导脐带间充质干细胞向脂肪细胞分化的差异. 结果:细胞传代20代以上,培养至第10代,无明显的形态和增殖能力改变;经传代纯化的脐带间充质干细胞形态均一,为梭形或成纤维样,呈漩涡样生长.细胞阳性表达CD29、CD44、CD105,而CD14、CD34、CD45表达呈阴性.不同诱导条件均可诱导UC-MSCs生成脂肪细胞,而合用地塞米松、1-甲基-3-异丁基黄嘌呤、胰岛素和吲哚美辛时效果最佳,诱导MSCs生成脂肪细胞的转化率可高达90％以上. 结论:(1)经组织块培养法可从新鲜脐带中获得间充质干细胞,且具有高度的增殖能力,与骨髓间充质干细胞相同的免疫表型,符合间充质干细胞的生物学特性.(2)体外成功诱导脐带间充质干细胞向脂肪细胞定向分化,脐带间充质干细胞可以作为组织工程脂肪的种子细胞.
脐带间充质干细胞 脂肪细胞 定向分化 体外诱导
杨建民 梁玉儒 郝文杰 王根银 李俊侠
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2014-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）