乙型脑炎病毒NS1”蛋白编码框的扩展对病毒毒力的影响

摘要：

通过分析乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)基因组中核糖体移码序列,在对NS2A基因实施同义突变基础上,设计2组引物,通过PCR突变方法,依次删除移码后NS1”基因开放阅读框的终止密码子,并将突变片段替换JEV感染性克隆pJEHEN中相应片段,获得了2株突变全长克隆.经体外转录合成RNA,再以RNA转染细胞,拯救出两株突变病毒vJET1和vJET2.通过RT-PCR扩增突变病毒中含突变位点的基因组片段,测序证实了vJET1基因组3690位核苷酸存在由T向A的突变,vJET2基因组3690位和3819位核苷酸均存在由T向A的突变.将vJET1和vJET2感染Vero细胞后,western blot检测显示,两株突变病毒表达的NS1”蛋白均出现延长现象.生长曲线显示,与亲本病毒vTHen相比,突变病毒增殖速度均出现下降.动物实验显示,与vTHen相比,vJET1和vJET2对小鼠的神经毒力与神经侵袭力也出现下降.上述结果表明,NS1”编码框的延伸降低病毒在体外培养细胞上的增值速度,也减弱了病毒对小鼠的毒力.

关键词： 乙型脑炎病毒 NS1”蛋白 编码框扩展 毒力评价

作者: 郭亦非 郑浩 郑旭晨 童武 刘飞 梁超 单同领 于海 童光志

作者单位: 中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

会议地点: 深圳

会议语种:中文

页码: 196-199

在线出版日期: 2014-04-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）