金黄色葡萄球菌TraP、FnBPA和α-溶血素融合蛋白免疫保护研究
金黄色葡萄球菌是一种人畜共患菌,也是奶牛乳房炎主要致病因之一.以往研究证明,金葡菌FnBPA和Trap蛋白作为免疫原在小鼠的攻毒试验中具有免疫保护性作用.α-溶血素(α-h1a)作为金葡菌在侵染过程中一种外分泌蛋白,其免疫优势片段也具有良好的免疫保护性作用;本研究拟对上述三种蛋白进行融合表达,研发一种新型亚单位嵌合疫苗,为金葡菌感染的协同防控奠定基础. 本研究采用Trap全蛋白、FnBPA的免疫优势片段FL和α-溶血素免疫优势片段hlaD,通过人工构建肽段Linker用overlap-PCR方法将三个目的片段串联,之后连入pET32a表达载体进行表达,获得的融合蛋白命名为TAF(Trap-hIaD-FL)。实验结果表明,TAF重组蛋白在小鼠模型中具有很好的免疫保护性作用,明显优于其他各对照实验组,在肺部攻毒试验中对S.aureus Newman株和HLJ123-1株的保护率分别达到100%和90%;在腹腔攻毒试验中对S.aureus Nemnan株和HLJ23-1株的保护率分别达到90%和80%;而各免疫组中的混合蛋白组,攻毒后免疫保护率不到50%。TAF实验组中检测的干扰素-γ,白介素-2,白介素-4,白介素-17高于其他各实验组。以上研究结果表明,TAF融合蛋白具有很好的免疫原性,能有效的抑制金葡菌感染,为今后研究多结构域的亚单位嵌合疫苗提供一定参考。
奶牛乳房炎 金黄色葡萄球菌 亚单位嵌合疫苗 蛋白融合表达
刘道龙 孙虎男 于永忠 崔玉东 陈亮 王歆桐 代建 杨轩 魏玉华 王健楠 于立权 吴志军
黑龙江八一农垦大学生命科技学院,黑龙江大庆163319 黑龙江八一农垦大学生命科技学院,黑龙江大庆163319;黑龙江八一农垦大学动物科技学院,黑龙江大庆163319 黑龙江八一农垦大学动物科技学院,黑龙江大庆163319
国内会议
中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会
深圳
中文
384-384
2014-04-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)