影响阳离子脂质体转染羊成纤维细胞效率的主要因素
在制备转基因克隆羊的研究中,如何提高阳离子脂质体介导基因转染羊成纤维细胞效率问题成为了目前研究的热点.本文首先介绍了阳离子脂质体类型,其次介绍了质粒的浓度、纯度和构型,然后介绍了细胞的生长状态和汇合度对转染效率也起着非常重要的作用,如果细胞汇合度低于40%或者高于80% ,其转染效率都会有所下降,介绍了脂质体与DNA的比例及转染时间,将超声波技术和脂质体转染技术有效地结合起来,不仅能明显的提高脂质介导的基因转染效率,还能增强基因转染的特异性,介绍了培养基中的血清和抗生素,不同脂质体转染效率差异很大,且每种脂质体对于不同种类细胞和同种类不同密度的细胞都有不同的转染条件。过高的脂质体对细胞有一定的毒性,过低反而影响转染效率。只有在细胞接种量、脂质体量、DNA量以及脂质体一DNA复合物与细胞作用时间达到最佳搭配时,才能获得最高的转染效率。
羊成纤维细胞 阳离子脂质体 基因克隆 转染效率
孙洪新 张英杰 敦伟涛
河北省畜牧兽医研究所,保定071000;河北农业大学动物科技学院,保定071000 河北农业大学动物科技学院,保定071000 河北省畜牧兽医研究所,保定071000
国内会议
山东聊城
中文
53-55
2014-08-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)