大熊猫秦岭亚种IL-2基因克隆及表达研究
目的:明确大熊猫四川种群和秦岭种群的IL-2在基因水平是否存在差异;获得具有生物活性的秦岭大熊猫IL-2原核表达产物.方法:采用RT-PCR方法从ConA诱导培养的秦岭大熊猫外周血淋巴细胞中扩增IL-2基因,利用DNA重组技术构建原核重组表达载体pET32a-IL-2,在E coli BL21(DE3)中利用IPTG诱导表达IL-2融合蛋白.融合蛋白利用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定,并进行可溶性分析和纯化.纯化的融合蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体;采用淋巴细胞增殖试验测定融合蛋白生物活性.结果:秦岭与四川大熊猫核苷酸相似性为99.4％.重组的IL-2融合蛋白的蛋白相对分子质量(Mr)为34 000;纯化融合蛋白免疫家兔获得了抗IL-2的多克隆抗体,该抗体能够检测到大熊猫淋巴细胞分泌的IL-2.
大熊猫 白细胞介素-2 基因克隆 原核表达
乔琦 马清义 朱辉 陈德坤
西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌712100 陕西野生动物抢救中心,陕西周至710400
国内会议
福州
中文
168-187
2010-11-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）