人IL-17F腺病毒载体的构建及其功能
目的:构建人白介素IL-17F(hIL-17F)的腺病毒载体,获得hIL-17F重组腺病毒子,为hIL-17F进行抑制血管形成和抑瘤效应的研究奠定基础.方法:以pUCm-T/hIL-17F重组质粒为模板PCR扩增hIL-17F,酶切连接到带有GFP标记的pAdTrack-CMV质粒上,PmeI线性化重组质粒pAdTrack-CMV-hIL-17F,与腺病毒质粒pAdeasy-1共转化BJ5183细菌,获得重组腺病毒载体pAdeasy-1-pTrack-CMV-hIL-17F经PacI线性化后转染QBI-293A细胞,收获腺病毒重组病毒子(Ad-hIL-17F),用RT-PCR和间接免疫荧光法鉴定人IL-17F基因表达.MTT法检测对ECV304细胞的生长抑制作用,ELISA法检测人血管内皮生长因子(VEGF)和血管生成素(Ang-1)基因在293A细胞、ECV304细胞中因子的表达水平;实时定量RT-PCR检测Ad-hIL-17F对293A细胞中人 血管内皮生长因子(VEGF)的转录的影响.结果:测序显示hIL-17F序列正确,RT-PCR和间接免疫荧光法检测到了IL-17F基因的表达.Ad-hIL-17F能显著抑制ECV304细胞的生长,抑制人血管内皮生长因子(VEGF)和血管生成素(Ang-1)基因在293A细胞、ECV304细胞中的表达.结论:成功构建和获得了hIL-17F的重组腺病毒载体(Ad-hIL-17F),Ad-hIL-17F可通过下调VEGF和Ang-1的分泌而抑制血管形成.
白介素17F 腺病毒 载体构建 药理作用
盛伟华 杨吉成 缪竞诚 韩亚丽 井莹莹
苏州大学医学部 细胞与分子生物学教研室 江苏苏州 215123
国内会议
呼和浩特
中文
90-98
2013-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）