会议专题

原核表达人基质金属蛋白酶抑制剂Ⅰ及其单克隆抗体的制备

目的:制备针对人基质金属蛋白酶抑制剂Ⅰ(TIMP-Ⅰ)融合蛋白的单克隆抗体.方法:用逆转录聚合酶链反应法从纤维化的肝组织中扩增TIMP-Ⅰ编码序列,产物克隆入pQE31载体,转化大肠杆菌BL21,诱导表达后通过6×His标签进行纯化,用纯化后的蛋白免疫Balb/c小鼠,采用常规的细胞融合技术制备针单克隆抗体,并对进行鉴定.结果:成功构建了TIMP-Ⅰ原核表达体系,并获得了重组蛋白.筛选出4株能稳定分泌抗TIMP-Ⅰ的单克隆抗体杂交瘤细胞株,免疫球蛋白类型有3株为IgG1类.Western Blot印迹显示这些单抗能特异结合TIMP-Ⅰ蛋白.结论:成功构建了人基质金属蛋白酶抑制剂Ⅰ原核表述体系,并获得了单克隆抗体.

基质金属蛋白酶抑制剂Ⅰ 融合蛋白 单克隆抗体 体系构建

侯俊 张健 刘爱霞 宋永继 李伯安

解放军第三○二医院临检中心 北京 100039

国内会议

第18次全国干扰素及细胞因子学术会议

呼和浩特

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101-103

2013-08-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)