Slit2基因在海兰褐蛋鸡不同组织的mRNA表达分析
选取饲养条件环境条件一致的海兰褐蛋鸡50只，在240日龄时分别采集心、肝、脾、肺、肾、卵巢、输卵管和脑组织，迅速收集并置于液氮中冷冻，-80℃保存样品待用。所采组织样用Trizol法提取总RNA，经琼脂糖凝胶电泳检测，并测定浓度，-80℃保存以备反转录。反转录反应按照试剂盒说明书进行合成cDNA。根据NCBI GenBank中已发表的鸡Slic2基因组序列，用Primer 5.0引物设计软件设计所需的特异性引物，上游引物:5”-CTGCCAT-CATCACTCATC-3”、下游引物:5”-CTTTATTTCCCATTCCTATC-3”;内参基因为GAPDH，上游引物:5”-AT-GGCATCCAAGGAGTGA-3”、下游引物:5”-GGGAGACAGAAGGGAACAG-3”，采用半定量RT-PCR检测Slit2基因在海兰褐鸡各组织中mRNA表达水平，通过Bandscan软件分析PCR产物灰度值，各组织mRNA的相对表达量用每个样品mRNA的表达量与内参基因GAPDH mRNA的表达量的比值表示。经PCR扩增获得的Slit2基因片段长度为187bp,GAPDH基因扩增片段长度为141bp。核酸蛋白测定仪检测总RNA的浓度及OD260nm和OD280nm，结果显示各组织样品ODzsoizao均在1.80-2.20之间，纯度较好;1％琼脂糖凝胶电泳可见3条完整条带，说明提取的总RNA质量可靠。各组织半定量RT-PCR检测，结果表明，Slit2基因在在海兰褐鸡8种被检样品组织中均有表达，根据mRNA表达水平由高到低顺序依次为肾脏、大脑、心脏、肝脏、脾脏、输卵管、卵巢和肺脏，表达量分别为1.2379、1.2331、1.2270 、1.2266 、1.2243、1.2172 、1.2083、1.2075。研究鸡Slit2基因在不同组织的mRNA表达变化及其相互之间的关系，对于了解Slit2基因在控制鸡各组织发育过程中的作用和调控机制具有重要意义。
海兰褐鸡养殖 分泌型糖蛋白2基因 表达水平 信使核糖核酸
范贤聪 徐日福 姜建萍 吕智超 刘强 张英英 魏曼莉
吉林农业大学动物科技学院,吉林长春130118
国内会议
江苏扬州
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184-184
2013-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）