鸡生殖细胞原代培养及慢病毒转染
本文通过对鸡的试验研究，结果表明(1)同一时期的鸡生殖细胞用二酶二步(胶原酶I、胰酶)消化法分离提取细胞的效果显著优于胶原酶I或胰酶，且二酶二步(胶原酶I、胰酶)消化法分离获得的鸡生殖细胞的细胞活率在95％左右。(2)不同时期的鸡生殖细胞，孵化15d的分离效果显著优于孵化20d和出壳8d的。(3)生殖细胞在缺乏支持细胞作为饲养层的情况下不易贴壁，且即使贴壁其在体外存活的时间也很短;有支持细胞贴壁生长的生殖细胞极易附于支持细胞，生长良好，存活时间长。(4)用GFP慢病毒表达质粒与辅助质粒共转染293t细胞生产慢病毒颗粒，病毒滴度为6.084×107TU/mL。(5)用GFP慢病毒转染原代培养的鸡生殖细胞，提取细胞RNA，反转录为cDNA后做RT-PCR检测到目的基因GFP的表达量为0.84*lO2copy/ugRNA。本试验结果说明孵化15d的鸡胚因其精原细胞刚刚形成，细胞活力强，因此分离效果与细胞活率较高。
雏鸡试验 生殖细胞 原代培养 慢病毒转染
赵丽玲 罗榕 程瑾 原一桐 王文魁 李慧锋
山西农业大学生命科学院,山西太谷030801 山西农业大学动物科技学院,山西太谷030801
国内会议
江苏扬州
中文
255-255
2013-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）