中药筋脉通对高糖培养海马神经细胞Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白表达的影响
目的:探讨糖尿病认知功能障碍中高糖条件对体外培养海马神经细胞凋亡蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3表达的影响,以及中药筋脉通含药血清培养的干预作用.方法:采用胰酶消化法、淋巴细胞滤液梯度离心法、以及细胞免疫荧光法进行新生鼠海马神经细胞的体外分离、纯化和鉴定;Western Blotting检测正常培养条件(正常对照组)、高糖培养条件(高糖组)、以及高糖合并Caspase抑制剂Z-VAD-FMK培养条件(阳性对照组)或合并筋脉通大、中、小剂量含药血清(筋脉通大、中、小剂量组培养条件下Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白表达的变化.结果:(1)成功建立新生鼠海马神经细胞体外培养模型,神经元以多极神经元为主,胞体呈圆形、体积小、折光性强,突起细长、分布均匀致密;(2)细胞免疫荧光法检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达,结果表明神经细胞纯度达95％以上;(3)Western Blotting检测高糖组Caspase-3、Bax表达明显增加,Bcl-2的表达下降,Bcl-2/Bax的比值明显下降,与正常对照组相比,差异均具有显著性(P＜0.05);(4)阳性对照组和筋脉通各剂量组的Caspase-3、Bax表达均明显下降,Bcl-2的表达明显升高,Bcl-2/Bax的比值明显升高,与高糖组相比,差异均具有显著性(P＜0.05);(5)筋脉通各剂量组Caspase-3和Bax表达较阳性对照组均明显下降(P＜0.05),但筋脉通低剂量组Bcl-2和Bcl-2/Bax的表达与阳性对照组无显著性差异(P＞0.05);(6)筋脉通大、中、小剂量组间Caspase-3表达的差异均具有显著性(P＜0.05),Bcl-2/Bax的比值在三组间呈下降的趋势,但三组间差异并不具显著性(P＞0.05).结论:(1)体外高糖培养海马神经细胞,可导致细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3的表达异常,从而导致神经细胞的凋亡;(2)而筋脉通含药血清可能通过提高Bcl-2蛋白的表达,减少Bax、Caspase-3的表达,上调Bcl-2/Bax的比值,从而减少高糖致海马神经细胞的凋亡.
糖尿病认知功能障碍 中药筋脉通 海马神经细胞 Bax蛋白 Bcl-2蛋白 Caspase-3蛋白
郭蕾蕾 张宏 田国庆 梁晓春
中国医学科学院 北京协和医学院 北京协和医院 100730
国内会议
第六届全国中西医结合内分泌代谢病学术大会暨中德代谢综合征高层论坛
北京
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185-194
2013-11-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）