当归补血汤对ox-LDL体外刺激人EPCs的影响及作用机制
目的:探讨当归补血汤(DBT)对氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导人外周血内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPc)功能、bcl-2mRNA及蛋白表达的影响.方法:密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,诱导培养EPCs成功后,贴壁细胞分成11组,对照组用含0.2%BSA的M199培养液;处理组(共5组):分别用含蒸馏水、辛伐他汀0.1umol/L、当归补血汤1,2,4g/L的M199培养液孵育24h,然后移去上清,加入不合胎牛血清的M199培养液继续孵育24h;ox-LDL刺激组(共5组)分别用含蒸馏水、辛伐他汀0.1umol/L、当归补血汤1,2,4g/L的M199培养液孵育24h,然后移去上清,加入含10mg/Lox-LDL的M199培养液继续孵育24h.MTT法检测各组细胞增殖力,黏附实验检测黏附力,transwell小室检测迁移力,体外血管生成试剂盒检测成小管力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;逆转录-聚合酶链式反应(RT—PCR)技术检测Bcl-2 mRNA表达;蛋白免疫印迹法检测Bcl-2蛋白表达水平.结果:辛伐他汀及DBT可促进EPCs的增殖、迁移、黏附及成小管力(P<0.05);ox-LDL诱导后,EPC功能受损并出现大量凋亡;在加入ox-LDL前进行药物干预,DBT可保护EPCs的增殖、迁移、黏附及成小管力,并呈浓度依赖性降低EPC的凋亡率(P<0.05);RT-PCR和蛋白免疫印记检测显示,辛伐他汀及DBT的Bcl-2mRNA及蛋白表达量增高,蒸馏水-ox组表达量降低;与蒸馏水-ox组比较,辛伐他汀及DBT各预处理组的Bcl-2mRNA及蛋白表达量增高(P<0.05).结论:DBT可促进EPCs功能,ox-LDL可诱导EPC凋亡、抑制EPC增殖,DBT能抑制ox-LDL的上述作用,其机制与上调Bcl-2基因及蛋白表达有关.
当归补血汤 中药药理 氧化低密度脂蛋白 内皮祖细胞
秦臻 黄水清
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北京
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379-386
2013-11-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)