体外共培养诱导骨髓基质干细胞向软骨细胞转化的实验研究

摘要：

目的：探讨软骨细胞微环境对BMSCs向软骨细胞分化的促进作用.方法：BMSCs与P3软骨细胞按一定比例进行体外共培养BMSCs组,软骨细胞组,2/1共培养组(BMSCs/软骨细胞),4/1共培养组(BMSCs/软骨细胞).在共培养后1d、3d、5d、7d、9d MTT法检测增殖活性;在共培养后1W、2W、3W甲苯胺蓝染色以观察软骨向分化状态;在共培养后1W、2W、3W以RT-PCR检测蛋白多糖和Ⅱ型胶原基因表达.结果：MTT检测结果显示1d、3d、5d、7d、9d时2/1共培养组、4/1共培养组增殖活性均高于BMSCs组,共培养组间的细胞增殖活性差异不显著.甲苯胺蓝染色显示BMSCs组呈阴性染色,胞核呈浅蓝染;软骨细胞组呈阳性染色,胞核被染成深蓝色,胞浆被染成紫色;2/1和4/1共培养组在1W、2W时均为阴性染色,显示以BMSCs为主,3W时共培养组阳性表达均增高,显示以软骨样细胞为主.蛋白多糖检测显示共培养组较BMSCs组在1W、2W、3W时的蛋白多糖表达均增强;较软骨细胞组在1W、2W时的蛋白多糖表达弱,3W时表达一致;共培养组之间各时点蛋白多糖表达差异均不显著.Ⅱ型胶原检测显示共培养组较BMSCs组在1W、2W、3W时的Ⅱ型胶原表达强;与软骨细胞组在1W、2W无显著性差异;3W时4/1共培养组的Ⅱ型胶原表达要强于其余各组.结论：适宜比例的软骨细胞可更有效地促进BMSCs向软骨方向分化.

关键词： 软骨缺损 骨髓基质干细胞 损伤修复 体外共培养

作者: 张杨 李秀兰 郭悦 叶春

作者单位: 天津市天津医院 300211

会议类型: 国内会议

会议名称: 第二十届全国中西医结合骨伤科学术研讨会、第二届中国医师协会中西医结合医师分会骨伤科学术年会、第十九届浙江省中西医结合骨伤科专业委员会学术年会

会议地点: 杭州

会议语种:中文

页码: 514-518

在线出版日期: 2013-06-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）