基于Taqman-MGB探针的猪瘟病毒野毒株荧光RT-PCR检测方法的研究

摘要：

本文应用MGB荧光RT-PCR技术对猪瘟病毒野毒株进行实时定量检测,以实现对猪瘟病毒野毒株与疫苗株的鉴别诊断.以猪瘟病毒5”端非编码区为扩增靶区,通过鉴别诊断位点的筛选、引物、探针和反应条件的优化,建立了猪瘟病毒野毒株荧光RT-PCR检测方法.试验结果表明,该方法的检测灵敏度为10拷贝/反应或3.0 TCID50/反应:对猪瘟病毒野毒株的检测结果均为阳性,而对猪瘟病毒疫苗株和其他猪源病毒的检测结果均为阴性,表明该方法具有较好的特异性;对515份临床样品的检测结果表明,该方法与RT-nPCR测序法的检测符合率为98.3％;猪瘟病毒人工感染猪实验结果表明,猪瘟野毒感染猪发病前2-4天即可被检测出阳性,疫苗免疫株检测结果始终为阴性。

关键词： 猪瘟病毒 荧光RT-PCR检测技术 Taqman-MGB探针 效果评估

作者: 温国元 宋念华 邵华斌 杨峻 罗青平 廖永洪 胡智斌 张蓉蓉 王红琳 艾地云 罗玲

作者单位: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,湖北省武汉市 430072;动物胚胎与分子育种湖北省重点实验室,湖北省武汉市 430072 湖北省动物疫病预防控制中心,湖北省武汉市 430064 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,湖北省武汉市 430072

会议类型: 国内会议

会议名称: 第三届全球猪业论坛暨第十一届(2013)中国猪业发展大会

会议地点: 武汉

会议语种:中文

页码: 136-140

在线出版日期: 2013-05-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）