麻疹病毒长-47纯化株(2BS细胞)三级毒种库的建立
目的:建立以人二倍体细胞(2BS株)为基质的麻疹病毒长47纯化株三级毒种库。方法:以麻疹病毒长47纯化株毒种(CEC)主代主种子批适应于2BS细胞,传至适宜代次作为主种子批及工作种子批,对毒种进行无菌试验、支原体检测和外源因子检测;同时对主种子批毒种进行病毒鉴别试验及猴体神经毒力试验。将毒种连续传代,测定各代次病毒滴度,检测不同保存条件下病毒稳定性,同时选择4个代次提取病毒核酸,扩增H基因序列,对H基因在传代过程中的遗传稳定性进行分析。结果:麻疹病毒长47纯化株毒适应于2BS细胞后,收获病毒时间一般在5～7d,病毒滴度范围在5.5～6.5CCH8./ml之间。病毒鉴别试验、无菌试验、支原体检查及外源因子检测符合2010版《中国药典》三部对病毒种子批的(除易感儿接种外)各项检定要求。经连续传代病毒滴度稳定,各代次基因测序未发生核苷酸和氨基酸的改变。结论:用2BS细胞作为培养麻疹病毒基质,建立了麻疹长47纯化株(2BS)毒种三级库,为改变麻疹减毒活疫苗生产基质细胞提供了科学依据。
三级毒种库 麻疹病毒长-47纯化株 人二倍体细胞 基因序列
王玮 沈红杰 黄国勇 李海燕 闫磊 郑晓丽
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2013-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）