我国云南登革4型病毒减毒株生物学特性和全基因组序列研究
目的:对两株登革4型病毒减毒株(Ban18 HK20和Ban18 HK30)的部分生物学特性进行研究,同时测定其全基因组序列并与母株(Ban18)序列比较,分析与毒力相关的位点。方法:将两株减毒株及其母株在Vero细胞传代后进行空斑形态、毒力和免疫原性的比较研究;提取上述三株病毒的基因组RNA,RT-PCR方法分段扩增其全基因组序列并测序,采用DNAStar软件包进行序列比对分析。结果:Ban18HK20株和Ban18 HK30株在Vero细胞上形成的空斑形态较其母株稍大且模糊。两株减毒株对9～11g小鼠的脑内lg( PFU/LD50)均＞4.5,而Ban18株的lg( PFU/LDs.)为0.4,二者对2～4日龄乳鼠的致病力也明显低于其母株Ban18株。将三株病毒稀释到106PFU/mL腹腔免疫小鼠,两周后用登革4型国际标准株H241株进行脑内攻击,结果表明Ban18株和Ban18 HK20株对H241脑内攻击的保护指数约为100,而Ban18 HK30株对H241的脑内攻击基本没有保护作用。比较Ban18株及其减毒株的全基因组序列,结果表明Ban18株和Ban18 HK20株有8处核苷酸差异,其中3处引起氨基酸变化,C111、E155、E369和3”UTR219四个位点可能与毒力密切相关。结论:Ban18 HK20和Ban18HK30毒力明显低于其母株,其中Ban18HK20免疫原性较好,是一株有希望的登革4型病毒疫苗候选株;全基因组序列比对结果表明C111、E155、E369和3”UTR219可能与毒力密切相关。
登革4型病毒减毒株 生物学特性 全基因组序列 毒力测定
陈柠 李玉华 俞永新 贾丽丽 徐宏山 刘欣玉 王志伟 岳广智 杨立宏 董关木
中国食品药品检定研究院虫媒病毒疫苗室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室,北京100050
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2013-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）