QPCR检测猪细小病毒方法的建立及其应用
目的:建立一种检测猪细小病毒(PPV)的荧光定量PCR方法,并应用于病毒去除工艺验证,评价在血液制品生产过程中辛酸沉淀及纳米膜过滤去除病毒的效果。方法:用上游引物(PI)5”-CCA AAA ATG CAA ACC CCA ATA-3,和下游引物(P2)5”-TCT GGC GGT GTT GGA GTT AAG-3”,在95W3min、95°C10s60 W10s条件下扩增40个循环,建立检测样品中PPV含量的QPCR方法并验证该方法的专一性、重复性和灵敏性;用该方法检测辛酸沉淀及纳米膜过滤去除制品中PPV的效果。结果:该方法实验内和实验间的精密度均小于5％,最低检测限为102copies/μl;辛酸处理可使样品中PPV滴度下降5Logs;不同公司生产的20nm膜滤器在过滤量及过滤效果方面有明显的差异,其中S公司生产的滤器效果最好,可使样品中的PPV滴度下降4Logs.结论:成功建立了具有良好专一性、重复性和灵敏性的荧光定量PCR方法。
生物制品 猪细小病毒 荧光定量 检测灵敏度
郑朝共 许锬 容新宗 黄琰
成都蓉生药业有限责任公司,成都610041
国内会议
上海
中文
293-298
2013-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）