抗甲肝病毒卵黄抗体(IgY)的制备及应用
目的:制备特异性抗甲肝病毒卵黄抗体(IgY),建立双抗体夹心ELISA法测定甲肝疫苗中抗原含量。方法:用纯化的甲肝病毒(HAV)免疫健康产蛋母鸡。抗体的分离纯化采用水提综合盐析亲和层析法;紫外分光法测定卵黄提取液的蛋白含量;还原型SDS-PAGE凝胶电泳分析测定提取蛋白的纯度及相对分子质量;间接ELISA法检测卵黄抗体的特异性、效价以及对温度和酸碱的耐受性;用纯化的卵黄抗体作为包被抗体,建立双抗体夹心ELISA法对疫苗生产过程中抗原含量的测定,并与市售试剂盒作比对。结果:亲和层析纯化后IgY的收获量约为3.67mg/ml,纯度为98.78％;间接ELISA检测抗体最高效价为1:16000,对酸碱有较好的耐受性;双抗体夹心ELISA法测定样品HAV含量与市售试剂盒比对,相关系数r=0.9527.结论:水提综合盐析亲和层析法提取的卵黄抗体产量、效价及稳定性均较高,建立的双抗体夹心ELISA法可用于生产与科研。
抗甲肝病毒卵黄抗体 制备工艺 抗原含量 分离纯化
夏青娟 刘令九
长春生物制品研究所有限责任公司,长春130062
国内会议
上海
中文
324-326
2013-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）