表达PRRSV GP5蛋白重组减毒猪霍乱沙门氏菌C78-1构建及生物学特性
本试验旨在构建表达猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)GP5蛋白口服重组减毒猪霍乱沙门氏菌活载体疫苗株.PCR克隆除去信号肽序列的PRRSV ORF5基因将其插入到表达载体pYA3493中,构建重组质粒pYA3493--dORF5.将重组质粒电转入减毒猪霍乱沙门氏菌基因缺失株(缺失crp,asd基因),获得PRRSV ORF5基因减毒猪霍乱沙门氏菌ΔcrpΔasdC78-1(pYA--dORF5)重组菌.该菌株保留了在DAP阴性环境中生存的能力;不能利用麦芽糖、蔗糖及果糖等碳源,但保留了利用葡萄糖的能力,其生长速度低于强毒株C78-1,而与ΔcrpΔasdC78-1相比变化不明显;在体外连续传代能够稳定遗传dORF5目的基因片段.Western blot证实重组菌表达的GP5蛋白能与PRRSV阳性血清特异性结合;通过口服途径与强毒株C78-1及猪霍乱沙门氏菌弱毒疫苗株C500相比,ΔcrpΔasdC 78-1(pYA--dORF5)毒力分别下降492倍和1.3倍.本试验成功构建了能稳定表达PRRSV GP5蛋白的口服重组减毒猪霍乱沙门氏菌,为研究PRRSV口服基因工程疫苗奠定了良好的基础.
猪繁殖与呼吸障碍综合征 GP5蛋白 猪霍乱沙门氏菌 减毒机制 重组质粒 口服疫苗 生物学特性
张淼丹 张明亮 张春杰 程相朝 李银聚 张俊峰 何雷
河南科技大学动物疫病与公共安全重点实验室,河南洛阳471003
国内会议
郑州
中文
447-452
2013-11-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）