会议专题

鼠伤寒沙门菌SL1344ΔcrpΔcyaΔasd缺失株平衡致死系统的构建与鉴定

目的:通过构建鼠伤寒沙门氏菌SL 1344ΔcrpΔcyaΔasd缺失株平衡致死系统,为研制更加安全有效的减毒鼠伤寒沙门菌基因缺失株和开发适于粘膜免疫更加理想的疫苗活载体奠定基础.方法:本文以x7213(pREΔasd)为供体菌,SL1344ΔcrpΔcya为受体菌进行结合转移,通过自杀性质粒介导的等位交换技术两步法筛选SL 1344ΔcrpΔcyaΔasd缺失株,并对其生物学特性进行了初步研究.结果:该缺失株在有外源DAP的存在下才能够正常生长,且能稳定遗传缺失的asd基因,其血清型与亲本株SL1344ΔcrpΔcya及强毒株SL1344保持一致;其生化特性与亲本株基本相同,但与强毒株相比变化较明显,且生长速度明显减慢;雏鸡毒力试验结果表明其毒力较SL1344降低了至少105倍.结论:本研究以SL 1344ΔcrpΔcya为亲本株构建了ΔcrpΔcyaΔasd三基因缺失株,对从死亡雏鸡肝脏中分离出的细菌做PCR和血清型鉴定表明,感染雏鸡的细菌是鼠伤寒沙门菌,应用Bliss法计算,强毒株SL1344的口服感染LD50为3.32×105 CFU,重组菌株SL1344ΔcrpΔcyaΔasd(pYA3493)的口服感染最高剂量未致雏鸡死亡,初步说明其毒力较强毒株SL1344降低了至少105倍,说明其作为疫苗载体具有良好的安全性,而且依赖DAP生长,与含有asd基因的无抗性质粒互补,构成宿主载体平衡致死系统,用于外源基因稳定表达,为将鼠伤寒沙门菌开发为一种安全高效的口服多价疫苗活载体奠定了基础.

鼠伤寒沙门菌 疫苗载体 基因缺失株 平衡致死系统

胡宁 程相朝 张春杰 李银聚 赵战勤 尚珂 陈桂华

河南科技大学动物疫病与公共安全重点实验室,河南洛阳471003

国内会议

河南省畜牧兽医学会第八届会员代表大会暨2013年学术研讨会

郑州

中文

610-610

2013-11-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)