SIP-GAPDH融合基因的构建与原核表达

摘要：

利用重叠延伸(SOEing)PCR技术,将罗非鱼病源无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)ZQ0910株SIP基因与GAPDH基因通过Linker序列融合,构建成为SIP-GAPDH融合基因.经BamH I/SalI双酶切后,定向克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行IPTG诱导表达.结果显示,在37℃,IPTG浓度为0.1mmol/L,诱导5h时蛋白表达量最大.Western Blot验证了pET-32a-SIP-GAPDH融合基因的蛋白分子量为102.01ku.SIP-GAPDH融合基因的成功构建与原核表达将为研制罗非鱼源无乳链球菌亚单位疫苗提供理论依据.

关键词： 罗非鱼 无乳链球菌 融合基因 原核表达

作者: 李桂欢 王蓓 鲁义善 汤菊芬 黄郁葱 吴灶和 简纪常

作者单位: 广东海洋大学水产学院,广东 湛江 524088;广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室,广东 湛江 524088;广东省水产经济动物病害控制重点实验室,广东 湛江 524088 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室,广东 湛江 524088;广东省水产经济动物病害控制重点实验室,广东 湛江 524088;仲恺农业工程学院 广东 广州 510225

会议类型: 国内会议

会议名称: 2013年环北部湾高校研究生海洋论坛

会议地点: 广东湛江

会议语种:中文

页码: 23-27

在线出版日期: 2013-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）