血清和饲养层对水牛精原干细胞体外培养的影响
本研究首先将水牛睾丸经二步酶消化法制成单细胞悬液,依次采用差速贴壁法和Percoll不连续密度梯度离心法分离和纯化精原细胞.在制备好的小鼠胎儿成纤维细胞饲养层上,采用含2.5%血清的培养液对精原细胞进行体外培养,观察血清和成纤维细胞对精原细胞生长的影响,并在体外成功培养了2周.通过提取体外培养精原干细胞总RNA,设计引物并对其进行基因鉴定和免疫细胞化学鉴定,并证实体外培养所得的细胞仍保持有精原干细胞的特性,并且该克隆是处在未分化状态的精原干细胞形成的.上述研究可为体外建立水牛精原干细胞长期培养体系提供技术支撑.
水牛养殖 精原干细胞 体外培养 血清浓度 饲养层
于雪 郭彬 种振路 董平 程英 梁爱心 韩丽 杨利国
动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室/华中农业大学,武汉430070
国内会议
南昌
中文
250-254
2013-06-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)