PCR-RFLP法用于半定量检测川贝母掺伪的研究
目的:探讨聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法在半定量检定川贝母掺伪中的应用.方法:将川贝母DNA与其它贝母DNA按不同比例混合,进行PCR扩增,限制性内切酶SmaI作用及琼脂糖凝胶电泳.随后用Image J软件分析凝胶电泳图上的条带,根据未切割条带与切割条带的灰度比,分析样品中掺伪的情况.结果:低于5%的掺伪比例即可通过该方法检测出,随掺伪比例增加,未切割条带逐渐增强,切割条带逐渐减弱,二者条带的灰度比值也逐渐增加,到掺伪50%时,几乎没有肉眼可见的切割条带.结论:PCR-RFLP法可用于川贝母中是否掺伪的鉴别,灵敏度高,且可作为检测川贝母样品中掺伪比例的半定量方法.此外,可将待检川贝母药材混合后打粉取样,从而比单个贝母取样更具有代表性,并方便进行掺伪程度的半定量检测.
川贝母 掺伪鉴定 半定量检测技术
张文娟 魏锋
中国食品药品检定研究院,北京,100050
国内会议
南宁
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2013-11-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)