基于Luminex的组分百日咳疫苗血清抗体效价的测定方法
目的：建立一种基于Luminex技术,可用于五组分百日咳疫苗抗体效价检测的多重间接免疫荧光方法.方法：将百日咳类毒素(PT),丝状血凝素(FHA),百日咳杆菌粘附素(PRN),百日咳菌鞭毛蛋白2,3型(FIM 2,3)分别与四种不同型号的微球进行耦联;四种与微球耦联的抗原在同一孔中与血清孵育,通过生物素标记抗体和链霉素标记藻红蛋白双重识别,用Luminex荧光检测得到荧光中位数值(Median Fluorescence)进行效价分析.用ELISA方法检测同一组血清样品中的抗体效价,将以上两种方法的结果进行比较.结果：通过对标准血清分析检测,建立了五组分百日咳疫苗血清抗体检测的标准曲线.与ELISA方法相比,Luminex方法的线性范围更宽.对五组分百日咳疫苗免疫后的50个小鼠血清样品的分析结果显示,Luminex检测的血清效价的平均值分别为PT 65.365IU/ml,FIM 15.052IU/ml,FHA 545.236IU/ml,PRN 7.876IU/ml,ELISA检测的血清效价的平均值分别为PT 72.640IU/ml,FIM 16.480IU/ml,FHA 589.474IU/ml,PRN 7.345IU/ml.两种检测方法表现出良好的相关性,R2分别为:PT 0.91,FIM 0.98,FHA 0.93,PRN 0.99.结论：与ELISA方法相比,基于Luminex的多重分析物的检测方法具有减少样品的消耗量,节省成本和测定时间,并且使多种目标分子之间相关性的分析更加准确等优点,可以用于五组分百日咳疫苗抗体效价检测.
百日咳疫苗 疫苗血清抗体 效价检测 多重间接免疫荧光法
朱涛 骆鹏 马肖 宋琳琳 邓捷 邵忠琦 毛慧华 宇学峰
天津科技大学,天津 300457 中国食品药品检定研究院百白破疫苗与毒素室,北京 100050 天津康希诺生物技术有限公司,天津 300457
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2013-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）