副猪嗜血杆菌hhdB基因无抗性标记缺失自杀载体的构建

摘要：

为了构建副猪嗜血杆菌hhdB基因无抗性标记缺失自杀载体,根据GenBank上发表的副猪嗜血杆菌hhdB基因上、下游同源臂序列(hhdB-up、hhdB-down)设计并合成2对特异性引物,PCR扩增hhdB-up和hhdB-down序列,经重叠PCR的方法将hhdB-up和hhdB-down序列进行拼接(hhdB-up+down),此拼接序列的两端引入了NotⅠ和SalⅠ限制性酶切位点,经相应酶切后将hhdB-up+down序列定向克隆到自杀性质粒载体pEMOC2中。结果表明:成功获得可在大肠杆菌E.β2155中稳定遗传的hhdB基因无抗性标记缺失自杀载体(pEMOC2ΔhhdB),从而为构建副猪嗜血杆菌hhdB基因无抗性标记缺失菌株奠定基础。

关键词： 副猪嗜血杆菌 基因缺失 分子标记 自杀载体

作者: 宋帅 李春玲 杨冬霞 李淼 岳磊

作者单位: 广东省农业科学院动物卫生研究所,广东省兽医公共卫生实验室,广东广州,510640

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会

会议地点: 徐州

会议语种:中文

页码: 637-640

在线出版日期: 2013-10-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）