大眼狮鲈鱼皮肤肿瘤病毒(WDSV)辅助基因orf-A在肿瘤发生和萎缩过程中的功能研究
根据酵母双杂交试验的需要，通过易错PCR的方法，对orf-A进行随机突变，进而获得orf-A的随机突变库。将PCR产物克隆到酵母双杂交诱饵表达载体上后，转化AH109酵母细胞，在含有X-α-GAL的色氨酸缺陷型培养基上培养，挑选白色克隆即为含有随机突变型orf-A的表达载体的单倍体酵母菌株。将该菌株与含有He1a229-cDNA的酵母双杂交文库菌株Y187共培养，然后涂平板筛选阳性克隆，分离诱饵表达载体和猎物载体，进行测序分析。在阳性克隆中，筛选到E2F5基因与OrfA有着较强的相互作用。E2F5是一种转录因子，属于E2F家族。该家族在细胞周期调控和肿瘤抑制蛋白功能，并且也是小DNA肿瘤病毒转录蛋白的靶标。E2F5与肿瘤抑制蛋白p130和p107相互作用，影响肿瘤的生长。
大眼狮鲈鱼皮肤肿瘤病毒 基因功能 肿瘤发生 表达载体
徐坤 张智英
西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌,712100
国内会议
呼和浩特
中文
1-1
2011-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）