定点突变法获得放线菌酮抗性基因

摘要：

本研究根据产朊假丝酵母L41基因序列，设计四条引物，以产朊假丝酵母基因组DNA为模板，利用套叠PCR和高保真聚合酶将L41基因第五十六位脯氨酸密码了突变为谷氨酰胺密码子，即可获得放线菌酮基因，为产朊假丝酵母转化体系的建立奠定良好的基础。研究中采用Pyrobest DNA Polymerase进行PCR扩增，其特点为可信度极高，而且与Taq DNAPolymerase具有相同的扩增效率。与Taq DNA Polymerase相比，即使不用Hot start法，非特异性带也可得到有效的控制，尤为重要的是，因为其具备3”-5” Exonuelease活性，在PCR扩增产物的3端不加碱基A，这使得套叠PCR大大提高了准确性。

关键词： 放线菌酮 酮抗性基因 定点突变法 产朊假丝酵母

作者: 包慧芳 崔春生 王炜 崔卫东 王陶

作者单位: 新疆农科院微生物应用研究所 乌鲁木齐 830091 新疆农科院微生物应用研究所 乌鲁木齐 830091;新疆特殊环境微生物工程技术研究中心 乌鲁木齐 830091

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国科协第六届青年学术年会卫星会议-新疆第六届青年学术年会暨首届博士生论坛

会议地点: 新疆克拉玛依

会议语种:中文

页码: 1440-1442

在线出版日期: 2006-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）