水稻乙酰辅酶A羧化酶BC功能域的克隆及原核表达载体的构建

摘要：

ACCase是一个高度调控的酶，在植物体内有极其复杂的机制控制它的活性。水稻质体中的ACCase是原核型ACCase，目前对ACCase的三个功能域了解较少。本研究通过计算机辅助分析，根据水稻质体ACCase基因序列设计了一对引物，并在引物的3′和5′端分别引入KpnⅠ和SalⅠ酶切位点，使扩增产物能以黏性末端定向插入原核表达载体，同时连接转化效率很高，便于阳性克隆的筛选。利用定向克隆技术将BC片段连接到PQE30载体的TS启动了下游，末端与TS终止了相连。DNA测定了从TS启动了开始的下游碱基，读码框正确。由于ACCase基因大小约7kb是植物中最长的基因之一，国内外未见全长的原核表达研究，今后将近一步研究另外两个功能域，为ACCase基因的原核表达及功能研究奠定基础。

关键词： 水稻质体 乙酰辅酶A羧化酶 功能域 基因克隆 原核表达

作者: 楚敏 赵虎基 郑明刚 乐锦华

作者单位: 新疆农科院微生物研究所 乌鲁木齐 830000 中国农业大学 北京 100094 石河子大学生物工程学院 石河子 832003

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国科协第六届青年学术年会卫星会议-新疆第六届青年学术年会暨首届博士生论坛

会议地点: 新疆克拉玛依

会议语种:中文

页码: 1535-1537

在线出版日期: 2006-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）