分蘖洋葱ISSR-PCR扩增体系的建立

摘要：

　　以分蘖洋葱幼嫩叶片DNA为试材,采用单因素试验,对ISSR-PCR扩增体系中的退火温度、模板DNA量、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶含量以及引物浓度等各因素进行优化.结果表明,在反应体系为25 μL反应液中,包含DNA模板40 ng(2 μL),10×PCR Buffer 3 μL,Mg2+(2.5 mmol·L-1)2 μL,dNTPs(2.5 mmol·L-1)3 μL,引物(5 mmol·L-1)3 μL,Taq 酶(5 U·μL-1)0.4 μL,退火温度为56 ℃时,分蘖洋葱ISSR-PCR 扩增获得最佳效果,初步建立分蘖洋葱叶片最佳ISSR-PCR扩增体系,为ISSR分子标记技术应用于分蘖洋葱种群遗传多样性分析、遗传图谱构建、核心种质资源保存利用等奠定分子生物学的理论基础和技术支撑.

关键词： 分蘖洋葱 ISSR-PCR 扩增体系优化

作者: 刘淑芹 吴凤芝 刘守伟 潘凯

作者单位: 东北农业大学园艺学院,哈尔滨150030

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国园艺学会小浆果分会第五届学术(产业)研讨会

会议地点: 黑龙江伊春

会议语种:中文

页码: 130-135

在线出版日期: 2012-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）