双重荧光定量PCR检测猴小肠结肠炎耶尔森氏菌和空肠弯曲杆菌研究
本研究根据小肠结肠炎耶尔森氏菌YST基因和空肠弯曲杆菌VSI基因的保守序列设计引物和探针,通过优化反应条件与参数,建立了可同时检测小肠结肠炎耶尔森氏菌和肠弯曲杆菌的双重荧光PCR方法。结果显示,该方法敏感度高,对两种细菌的检测低限均低于10cfu/g。特异性强,仅对目标菌呈阳性反应,对常见非目标菌均呈阴性反应,重复性好,定量检测批内和批间的变异系数均小于1%,快速简便,能在1个工作日内完成对猴YE菌和空弯菌的检验,经济实惠,可同步检验耶尔森氏菌和空弯杆菌,效率是单重荧光PCR的2倍。粪便杂质对反应敏感度有一定程度的干扰,可通过对样品增菌提高反应敏感度得以弥补。
小肠结肠炎 耶尔森氏菌 空肠弯曲杆菌 病菌检测 双重荧光定量PCR技术
温和心 蒋荣华 王杰 李世照 龙英全 罗博 盘宝进
贵港出入境检验检疫局 广西 贵港 537100;国家灵长类实验动物检测重点实验室 广西 南宁530021 贵港出入境检验检疫局 广西 贵港 537100 国家灵长类实验动物检测重点实验室 广西 南宁530021
国内会议
成都
中文
140-145
2013-08-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)