利用iTRAQ技术研究PCV2感染PAMs胞内蛋白和信号通路的变化

目的:研究PCV2感染猪肺泡巨噬细胞(PAMs)后胞内蛋白变化,揭示PCV2所引起免疫抑制的机制.方法:选取PCV2和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗原和抗体均为阴性的普通断奶仔猪,分离和培养猪肺泡巨噬细胞(PAMs),分为试验组和对照组,试验组PAMs用PCV2感染,对照组PAMs 加等量的细胞培养液,并于感染后第12h、24h和48h收集PAMs,用间接免疫荧光法检测PCV2感染PAMs情况,采用定量蛋白质组学技术——相对和绝对定量的等量异位标签(iTRAQ)技术结合Nano-LC-MS/MS,采用David在线对差异蛋白进行功能注释聚类分析,运用KEGG对差异蛋白参与的信号途径分析.结果及结论:PCV2感染后12h、24h和48h,PAMs中均见有PCV2抗原,并随感染时间而逐渐增加;3个不同时间点,表现出有显著改变的差异蛋白218个,其中显著上调92个,显著下调120个,这些差异表达蛋白分别与细胞结构,细胞内信号传导,细胞黏附和结合等生物过程相关;KEGG分析发现,差异蛋白涉及的4条信号途径具有一定显著性(P<0.05),包括核糖体、系统性红斑狼疮和缬氨酸,亮氨酸和异亮氨酸降解和间隙连接.定量蛋白质组学的研究结果,为进一步研究相关蛋白在PCV2的致病性方面提供了依据.
猪圆环病毒2型感染 免疫抑制 猪肺泡巨噬细胞 信号通路 定量检测
陈萌萌 韩俊源 张亚群 张书霞
南京农业大学,南京210095
国内会议
2013年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会学术研讨会
南京
中文
58-58
2013-08-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)