自噬在ORFV感染宿主细胞中的作用研究
目的:旨在通过对ORFV感染宿主细胞胎羊鼻甲骨细胞(OFTu)的自噬标志性分子LC3Ⅱ的转录和表达情况进行检测,研究自噬对ORFV复制增殖的影响,阐明羊传染性脓疱病的分子发生机理。方法:将ORFV感染后12h、24h、36h、48h的OFTu细胞经戊二醛进行固定,制作相应的超薄切片,观察是否形成有自噬体;同时利用间接免疫荧光对细胞内源性LC3Ⅱ的分布变化进行检测以观察自噬体的形成情况。利用Western Blotting检测ORFV感染不同时间(12h、24h、36h、48h、72h、84h和96h)OFTu细胞中LC3型别的转换,评估自噬发生的过程。结果:超微结构观察发现,在感染后36 h可观察到自噬体形成;间接免疫荧光观察结果显示,在未感染ORFV的细胞中LC3呈弥散分布,而LC3在感染ORFV的细胞中发生点状聚集,这表明ORFV感染诱导细胞发生了自噬;Western Blotting结果发现染毒细胞LC3的型别转换逐渐增加,阴性对照组未见明显变化。以上结果表明ORFV可以诱导OFTu细胞发生自噬,目前正在进行细胞自噬的发生对ORFV复制影响的研究。结论:本试验通过研究自噬对ORFV复制增殖的影响,为进一步探索与ORFV与宿主细胞互作等的相关研究提供理论基础,并为ORFV致病机制的阐明及寻找有效的抗病毒手段奠定基础。
羊传染性脓疤病毒感染 致病机制 宿主细胞 自噬机理
高丰 赵魁 贺文琦 成军 王改丽
吉林大学,长春130062
国内会议
2013年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会学术研讨会
南京
中文
116-116
2013-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）