PiggyBac转座子介导的SV40T/p53转基因鼠生产及诱导细胞永生化研究

摘要：

PiggyBac转座子是高效的转基因研究工具,可将外源基因插入到基因组中的TTAA位点,可携带高达150kb进行转座且转基因效率高达10％.本文构建了基于PiggyBac转座子的转基因载体PB-rtTA-NIT-STP,并在小鼠ES细胞系中对载体功能进行验证.该载体含有四环素诱导的tet-on系统调控的SV40T和p53基因、与tet-on系统结合的rtTA转录因子以及用于正负向筛选的LoxP-neo-IRES-tk-LoxP基因表达盒.通过构建基于转座子载体PB-rtTA-NIT-STP和转座酶载体PB-transposase的转基因小鼠,获得能够诱导表达SV40T/p53的转基因鼠,通过杂交获得大量转基因小鼠后代,分离其原代细胞并通过四环素类似物多西霉素(Dox)的诱导,在小鼠原代细胞中表达目的基因,实现细胞的永生化,为细胞功能和基因功能研究提供材料.

关键词： 转基因动物 表达载体 调控基因 功能分析

作者: 张婷婷 李欣憶 陈知龙 张智英

作者单位: 西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌,712100

会议类型: 国内会议

会议名称: 第七次全国动物生物技术学术研讨会暨新疆畜牧科学院第六次学术年会

会议地点: 乌鲁木齐

会议语种:中文

页码: 132-132

在线出版日期: 2013-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）