人角质形成细胞复合异种真皮支架三维培养的组织学观察
观察人角质形成细胞复合异种脱细胞真皮基质三维培养的组织形态学变化,初步探讨体外构建人组织工程皮肤的培养条件.方法人永生化角质形成细胞(HaCaT)用无血清角质形成细胞培养基(DK-SFM)进行培养.将处于对数生长期的HaCaT按2×105个细胞/cm2密度接种在改良法制备的异种脱细胞真皮基质(ADM)上浸没培养5天;然后转为气液相培养5天.扫描电镜观察ADM及其复合HaCaT培养第1天和第5天的细胞生长情况,HE染色观察ADM及其复合HaCaT培养1天、5天和10天的组织学变化.结果ADM大体呈白色纤维状组织,质地柔软.HE染色光镜和扫描电镜显示ADM组织结构疏松,分别呈”鸟巢”状和”方便面”状结构,胶原束完整,未见细胞及细胞残留成分.扫描电镜观察细胞接种培养1天已粘附并伸出伪足,5天汇合成片;HE染色观察细胞接种1天细胞散在,5天形成一条连续的线状细胞层,10天形成3-6层细胞复层,局部亦可见细胞有向ADM内生长的趋势.结论采用改良法制作的异种ADM结构疏松,有利于人角质形成细胞在其表面粘附和培养液营养成分的渗透,异种脱细胞真皮复合人永生化角质形成细胞三维培养可以在10天内初步获得复层人组织工程皮肤.
生物医学 组织工程 人角质形成细胞复合异种真皮支架 形态学
彭代智 朱崇涛 王丽华 何斌 郑必祥 周新 罗海水 王勇 刘敬
国内会议
江西井冈山
中文
331-334
2009-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）