会议专题

人表面活性物质蛋白-B基因启动子荧光素酶报告基因重组质粒的构建及活性检测

目的:构建人表面活性物质蛋白-B(SP-B)基因启动子荧光素酶报告基因重组质粒,并分析其在H441细胞中的转录活性。方法:以人基因组DNA为模板,PCR扩增SP-B启动子(-218/+435bp)序列片段,构建重组质粒,进行酶切及测序鉴定。结果:细胞裂解液双荧光素酶活性间接反映启动子活性,pGL3-basic/pGL4.17-SP-B-promoter重组质粒较各自的空白质粒载体荧光素酶活性均明显升高,两组比较差异有统计学意义。pGL4.17重组质粒荧光素酶活性明显高于pGL3-basic重组质粒,差异有统计学意义。结论:成功构建具有sP-B基因转录活性的重组质粒,pGL4.17重组质粒荧光素酶活性高,是后续研究SP-B基因转录调控更好的选择。

人表面活性物质蛋白-B 基因启动子 荧光素酶 重组质粒 检测技术

王席娟 蔡保欢 李文斌 刘伟 王靓 常立文

华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科,武汉430030

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2013-04-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)