利用PCR方法检测锦鲤疱疹病毒三个主要靶基因
为建立锦鲤疱疹病毒多重PCR检测方法进行探索性研究,将锦鲤疱疹病毒接种鲤鱼鳍条细胞,收获细胞病变悬液,提取DNA;根据GenBank中锦鲤疱疹病毒(KHV)基因序列和出入境检验检疫行业标准推荐的基因(ORF7),设计合成3对特异性引物,针对胸苷激酶基因(TK)、聚合酶基因(Sph)和ORF7基因的进行PCR检测,通过优化后的体系进行特异性、敏感性试验和样品检测.结果表明,三对引物分别特异性扩增出409bp、292bp和484bp片段,敏感性试验表明TK基因敏感性高于Sph和ORF7基因,最低检测核酸拷贝数为1.9×106 copies/μ L.采用三个PCR方法对八个有临床症状的样品进行检测,其中三份样品的三个基因PCR结果均为阳性.因此,三个PCR方法均可用于锦鲤疱疹病毒的检测及确证实验.
锦鲤疱疹病毒 PCR 检测
孟庆峰 张琼 宋战昀 肖成蕊 刘阳 蔡阳 张艳 钱爱东 王伟利
吉林农业大学动物科技学院,吉林长春130118;吉林出入境检验检疫局,吉林长春130062 辽宁出入境检验检疫局,辽宁大连116001 吉林出入境检验检疫局,吉林长春130062 吉林农业大学动物科技学院,吉林长春130118
国内会议
厦门
中文
218-218
2011-11-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)