会议专题

蛇足石杉1-脱氧-D-木酮糖5-磷酸还原异构酶(HsDXR1)基因克隆及表达分析

基于本实验室已获得的蛇足石杉转录组数据,获得一个编码1-脱氧-D-木酮糖5-磷酸还原异构酶(1-deoxy-D-xylulose-5-phosphate reductoisomerase,DXR)的转录本,分析其开放阅读框序列,发现该转录本编码全长为1,440bp的HsDXR1基因,含有479个氨基酸残基.采用RT-PCR方法获得了HsDXR1全长,并对HsDXR1编码蛋白进行理化性质、蛋白二级结构及三维结构预测分析,发现HsDXR1蛋白的预测分子量51.4961kDa,等电点为6.44;不含信号肽和跨膜区;亚细胞定位预测显示该蛋白最可能定位于叶绿体.与拟南芥和水稻的DXR蛋白相比,具有DXR蛋白典型的结构域.实时荧光定量PCR方法检测HsDXR基因在蛇足石杉的茎中表达量最高,其次为根,在叶中表达量最低.本研究在国内外首次获得蛇足石杉HsDXR1基因的编码区序列,为进一步研究HsDXR1在蛇足石杉萜类化合物生物合成途径中的功能奠定基础.

蛇足石杉 磷酸还原异构酶 基因克隆 生物活性

罗红梅 孙超 宋经元 殷秀梅 牛云云 向丽 陈士林 李榕涛 李标 徐晓兰 林余霖 胡志刚 姚辉 王德立 何柳

中国医学科学院、北京协和医学院药用植物研究所,濒危药材繁育国家工程实验室,北京 100193 中国医学科学院、北京协和医学院药用植物研究所,濒危药材繁育国家工程实验室,北京 100193;中国中医科学院中药研究所,北京 100700 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所,海南 海口 570100 中国医学科学院、北京协和医学院药用植物研究所,濒危药材繁育国家工程实验室,北京 100193;湖北中医药大学药学院,湖北 武汉 430065

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2013-05-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)