内质网应激介导糖原合成酶激酶-3β促进肝细胞凋亡
目的:探讨细胞内信号分子GSK3 β在内质网应激诱导肝细胞凋亡中的作用.方法:以小鼠肝癌细胞株Hepa 1细胞为研究对象,利用化学药物Tunicamycin (20 μg/ml)为内质网应激诱导剂,建立肝细胞凋亡模型.利用化学药物SB216763特异性抑制GSK3 β活性,在Tunicamycin诱导细胞凋亡前1小时给予干预处理.利用Acetoxymethyl(AM)/碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)对活细胞/凋亡细胞进行检测;再利用培养细胞上清乳酸脱氢酶(LDH)的检测评价细胞凋亡情况;利用免疫印迹方法检测p-GSK3 β蛋白、内质网应激相关凋亡蛋白GRP78,CHOP,Caspase-12以及Caspase3、Cleaved Caspase3蛋白的表达.结果:研究表明，诱导的内质网应激促进GSK3β活性升高，并具有时间依赖型和剂量依赖型;抑制GSK3β活性缓解了Tunicamycin诱导的内质网应激:GRP78, CHOP和Caspase-12的表达被抑制;与此同时GSK3β活性抑制显著减轻了内质网应激诱导的Hepa 1细胞凋亡:与内质网应激诱导Hepa 1凋亡模型组相比，SB216763干预组PI染色的凋亡细胞显著减少，培养细胞上清中的LDH显著下降;此外，Western blot结果显示GSK3p活性抑制减少了CleavedCaspase3活性蛋白的表达。结论:GSK3p是内质网应激诱导细胞凋亡通路中的一种重要信号分子，抑制GSK3p活性通过减轻内质网应激而改善肝细胞凋亡。
肝细胞凋亡 内质网应激 糖原合成酶激酶-3β 机理分析
任锋 杨丙章 温韬 朴正福 郑素军 张晶 陈煜 陈德喜 段钟平
首都医科大学附属北京佑安医院 100069
国内会议
北京
中文
231-232
2013-05-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）