STAT5A基因有效siRNA序列的筛选及其对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响
目的:筛选针对STAT5A基因的有效的siRNA,研究抑制STAT5A基因的表达对人肝癌HepG2细胞增殖、周期及凋亡的影响,探讨STAT5A基因在肝癌发生发展中的作用.方法:设计并化学合成针对STAT5A基因三个靶点的siRNA,采用脂质体法转染肝癌细胞HepG2,分别用半定量RT-PCR、western blot技术检测转染后HepG2细胞STAT5AmRNA和蛋白表达的变化,从中筛选出一段干扰效率最显著的siRNA;用该siRNA转染HepG2细胞,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测凋亡率.结果:3段STAT5A基因的siRNA对HepG2细胞中STAT5A mRNA和蛋白表达均有不同程度的抑制作用,其中以siRNA-3697的干扰效率最高,STAT5A mRNA和蛋白的表达抑制率分别为72.03%, 66.27 % (P<0.05);并能使细胞生长速度减慢、增殖显著抑制,细胞凋亡率为33%(P<0.05)。结论:成功筛选出针对STATSA基因的有效的siRNA;该siRNA可特异地阻断HepG2细胞STAT5A基因的表达,抑制细胞生长,诱导细胞凋亡。
肝癌 细胞生物学 基因表达 序列分析
扬华秀 曾永秋 曹阳 林春燕 黄燕 李洁
泸州医学院附属中医院肝病科,泸州医学院遗传学研究室
国内会议
北京
中文
343-343
2013-05-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)