高致病性猪链球菌2型多重实时荧光定量PCR检测方法的建立

摘要：

目的：建立对高致病性猪链球菌2型毒力基因SalK、virB4-89K、cps2J同步检测的多重实时荧光定量PCR检测方法。方法：根据SalK、virB4-89K、cps2J基因保守区域设计并合成3对引物及其探针；通过反应体系和扩增条件优化,建立快速鉴定高致病性猪链球菌2型的方法,并对方法的特异性、敏感性、重复性指标进行评估。结果：反应体系具有良好的扩增效率,全部扩增检测可在60 min内完成。SalK、virB4-89K、cp2J基因检测灵敏度分别为19 cfu/ml、27 cfu/ml和32 cfu/ml.重复性试验中变异系数均小于3％。用该方法考核33株猪链球菌,包括1/2型、1型、3型至33型,以及9株常见对照菌株,仅猪链球菌1/2型检测到cp2J基因荧光信号增强。对疫情现场获得的SS2感染者血液进行检测,3个基因均阳性。结论：建立的多重实时荧光定量PCR方法可快速检测高致病性猪链球菌2型,并能鉴定是否含有89K毒力岛基因SalK、virB4-89K,具有敏感、特异、重复性好的特点。

关键词： 猪链球菌 荧光定量 基因检测 测量方法

作者: 王长军 朱静 张锦海 胡丹 石洁 张先云 李先富 潘秀珍

作者单位: 南京军区军事医学研究所,江苏南京210002;南京医科大学基础医学院,江苏南京210029 南京军区军事医学研究所,江苏南京210002

会议类型: 国内会议

会议名称: 江西省科协第二届学术年会暨华东地区第十一次流行病学学术交流会议

会议地点: 江西鹰潭

会议语种:中文

页码: 167-172

在线出版日期: 2012-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）