苏云金芽胞杆菌4AJ1细菌素对单增李斯特菌的活性研究
目的:研究苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)细菌素(bacteriocin)对单核细胞增多性李斯特菌(Listeria monocytogenes,简称Lm)的抑菌活性。并进一步从细菌素产生过程动态监测、部分纯化及其生化特性等方面分析了Bt4AJ1细菌素的各项指标。方法:采用双层覆盖法确定Bt4AJ1对Lm ATCC15313的抑制作用;利用饱和硫酸铵溶液分级沉降Bt4AJ1上清液,部分纯化细菌素4AJ1;采用牛津杯方法测定不同饱和度的硫酸铵沉降得到的细菌素4AJ1的抑菌活性,并利用Tricine-SDS-PAGE电泳和凝胶原位检测技术分析细菌素4A J1的分子量;采用牛津杯法测定酶、温度和pH值对细菌素4AJ1活性的影响。结果:Bt4AJ1发酵上清液对Lm ATCC15313有抑制作用。Bt4AJ1在培养24h时对Lm ATCC15313具有最高的活性,其细菌素活性最高达522.82 U.Tricine-SDS-PAGE电泳结果表明70%、80%和90%的饱和硫酸铵对细菌素具有较好的沉降效果。凝胶原位技术确定细菌素4AJ1分子量约为6.5KD。胰蛋白酶、脂肪酶-Ⅶ和蛋白酶K会使细菌素4AJ1的抗菌活性明显提高,而α-胰凝乳蛋白酶-Ⅱ、RNA酶和α-淀粉酶都会降低细菌4AJ1的抗菌活性。细菌素具有较高的耐热性,在80℃时仍有活性,细菌素在pH值6~9时保持活性稳定。结论:对Lm ATCC15313具有明显抑制作用的细菌素4AJ1是一种分子量约6.5KD的多肽,具有较高的耐热性,较广的pH耐受范围,在预防和控制Lm引起的食源性疾病上具有潜在的价值。
苏云金芽胞杆菌 单核细胞增多性李斯特菌 细菌素 生物活性
潘洁茹 肖颖 张巧铃 李丽芬 刘秀峰 叶海梅 黄天培 郑能雄
350002,福州市疾病预防控制中心,福建农林大学生物农药与化学生物学教育部重点实验室
国内会议
江西省科协第二届学术年会暨华东地区第十一次流行病学学术交流会议
江西鹰潭
中文
661-668
2012-09-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)