GRα-GST融合蛋白的重组与表达
目的：构建GRα-GST融合蛋白,以期为筛选类糖皮质激素样中药提供工具。方法：运用RT-PCR扩增得到包含CDS的GRα基因序列后,经T-A克隆插入PMD-18载体。以此重组载体为模板扩增含有BamHⅠ与XhoⅠ酶切位点的GRαORF,插入pGEX-4T-1载体后形成了重组载体,并使其在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导表达融合蛋白,再用SIDS-PAGE检测融合蛋白的表达。结果：成功的将CRα-全基因构建入原校表达载体pGEX-4T-1中。测序结果表明载体构建成功,无插入和移码突变。经IPTG诱导后获得与预测大小(112kDa)完全一致的目的蛋白即GRa-GST融合蛋白。结论：成功获得了重组质粒并在大肠杆菌中较好的诱导表达得到了GRα-GST融合蛋白。
糖皮质激素 融合蛋白 原核表达 基因重组
涂继方 温成平 孙静 徐莉 季巾君 谢志军
浙江中医药大学,浙江杭州310053
国内会议
黄山
中文
114-116
2012-08-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）