人源S100A4蛋白的表达、纯化与鉴定
目的：构建pET32a-S100A4表达载体,表达纯化人源S100A4蛋白,为其进一步应用奠定基础。方法：采用全基因合成法合成人源S100A4基因；通过genebank查询人源S100A4蛋白的氨基酸序列,进行序列优化设计,同时引入Nde Ⅰ和XhoⅠ酶切位点,构建原核表达载体pET32a-S100A4,IPTG诱导其在大肠杆菌(E.coli BL21 (DE3))中表达，最后采用DEAE阴离子交换层析法纯化人源S100A4蛋白.结果：酶切鉴定和测序分析显示,人源S100A4的基因被成功插入pET32a多克隆位点；S100A4的基因片段在pET32a中的插入位点、碱基序列及读码框和终止子的次序完全正确,S100A4的基因序列位于表达载体pET32a的序列下游。经诱导表达和亲和纯化,最终获得了人源S100A4蛋白。结论：成功建立了人源S100A4蛋白表达载体,表达菌株经诱导表达和纯化,获得了高纯度的蛋白，为进一步研究人源S100A4蛋白相关的生物学功能奠定了基础。
S100A4蛋白 序列分析 生物学功能
王天辉 陈昀赟 刘子泉 刘洪涛 张娜 徐传香 陈学伟
军事医学科学院卫生学环境医学研究所
国内会议
银川
中文
471-471
2012-08-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）