不同植核手术对池蝶蚌外套膜和珍珠囊中钙调蛋白表达的影响
在贝类珍珠形成过程中,钙调蛋白(CaM)被证实在钙代谢过程中扮演了重要的角色,可能参与贝类珍珠形成的矿化过程。到目前为止,CaM在调节淡水贝类钙代谢过程中具体行使的功能尚未报道。池蝶蚌(Hyriopsis schlegelii原产于日本滋贺县琵琶湖,是日本特有的淡水贝类养殖品种。与其他淡水珍珠贝类相较,池蝶蚌拥有更好的育珠性能。本研究利用QRT-PCR技术分析了池蝶蚌在进行两种植核手术后,珍珠囊和外套膜以及未手术对照组外套膜中的CaM基因表达变化情况,结果表明池蝶蚌CaM对有核珍珠和无核珍珠的形成存在不同的表达方式。此外,将钙调蛋白cDNA的核心保守序列,正向地克隆到pET-28a表达载体,成功构建原核表达载体并进行诱导表达。利用亲和层析法,获得了纯化的钙调蛋白,并将其作为抗原免疫家兔,制备了多克隆抗体。制作了外套膜和珍珠囊组织的冰冻切片,利用钙调蛋白多克隆抗体,对池蝶蚌钙调蛋白在外套膜和珍珠囊上的分布进行免疫荧光定位检测。本实验为进一步了解池蝶蚌钙调蛋白在珍珠形成时的具体功能,提供了一点分子生物学方面的数据。
池蝶蚌 CaM Real-time PCR 免疫荧光 外套膜 珍珠囊
熊文芳 刘芳兰 王诚远 盛军庆 彭扣 王军花 洪一江
南昌大学生命科学学院 南昌330031
国内会议
武汉
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41-41
2012-10-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)