斑点叉尾鮰源鲁氏耶尔森氏菌p1基因的克隆、原核表达及表达条件优化

摘要：

　　根据GenBank中公布的鲁氏耶尔森氏菌p1基因(yrp1)序列设计特异性引物,采用PCR方法扩增出分离自患病斑点叉尾鮰的鲁氏耶尔森氏菌的p1基因,将其克隆到pMD19-T载体上,通过Amp抗性筛选、菌落PCR和单/双酶切鉴定之后送大连宝生物公司测序,然后亚克隆至pET-32a(+)载体,转化BL21(DE3)表达宿主菌,IPTG诱导并对表达条件进行优化。结果显示：重组表达质粒经IPTG诱导后,表达出约70kDa的融合蛋白,主要以包涵体的形式大量存在于沉淀中。最佳的诱导条件为IPTG浓度0.8mmol/L,37℃诱导表达4h。

关键词： 鲁氏耶尔森氏菌 克隆基因 原核表达 斑点叉尾鮰

作者: Hai Lian 连海 Kai-yu Wang 汪开毓 Jin-lu Huang 黄锦炉 Jun Wang 王均 Qiao-feng Mou 牟巧凤 Xi Fu 付希 Chang-hong Miao 苗常鸿

作者单位: Fisheries Department of Sichuau Agricultural University, Ya”an,Sichuan 625014 ;Key Laboratory of Ani 四川农业大学鱼病研究中心,四川雅安 625014;四川农业大学动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川雅安 625014

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国南方渔业论坛暨第二十八次学术会议

会议地点: 贵阳

会议语种:中文

页码: 256-263

在线出版日期: 2012-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）