新型毕赤酵母表面展示体系的构建及运用
本实验室成功的利用酿酒酵母的GPI型壁蛋白Agαlp,F1o1p,Sedlp等作为锚定蛋白将CALB展示在毕赤酵母细胞表面。为了扩展毕赤酵母表面展示锚定蛋白的范围，提高毕赤酵母展示CALB的展示量和展示酶活，本研究利用GPI型锚定的蛋白的三个特点，从Pichia Pastoris GS 115中预测到了一个潜在的GPI型蛋白，将其命名为Gcw12p。以Gcw12p为锚定蛋白在毕赤酵母细胞表面展示CALB(N端含FLAG标签)构建了一种新型的毕赤酵母表面展示体系。流式细胞术和Western Blot的检测结果都说明表达的融合蛋白经过糖基化修饰后共价连接到细胞壁上，预测到的Gcw12p为Pichia Pastoris GS115中的GPI型的细胞壁蛋白，可用作锚定蛋白构建新型的毕赤酵母表面展示体系。经过脂肪酶的诱导表达后分别测定了菌体、上清及胞内的CALB的水解酶活，分别为16.62U/mL (1577.7U/g), 2.45U/mL, 4.34U/mL，说明新构建的展示体系明显的提高了展示酶CALB的水解酶活。
发酵工业 酶制剂生产 毕赤酵母 表面展示 体系构建
张莉 周新莹 韩双艳 林影
广东省广州番禺大学城华南理工大学生物科学与工程学院,广东省发酵与酶工程重点实验室 510006
国内会议
大连
中文
167-168
2012-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）